MDA在酸性和高温条件下，与硫代巴比妥酸（Thiobarbituric acid，TBA）反应，生成棕红色的三甲川（3,5,5-三甲基恶唑-2,4-二酮），最大吸收波长为532 nm。在此波长下进行比色可估测样品中过氧化脂质的含量。但是测定动植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，其与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450 nm，但532 nm处也有吸收。所以同时测定600 nm、532 nm、450 nm下的吸光度，利用532 nm与450 nm、600 nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。
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