上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4624 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4623 | 规格:50T/48S |
可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 65 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂二 |
粉剂×2 瓶 |
4℃保存 |
试剂三 |
粉剂×2 瓶 |
4℃保存 |
标准液 |
液体 1 mL×1 支 |
4℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂二:临用前加入 1.5 mL 蒸馏水溶解,再缓慢加 405 μL 浓硫酸;
2、 试剂三:临用前配制,依次加入 11 mL 蒸馏水充分溶解,再加入 1.6 mL 试剂二,充分混合;
3、 标准液:5 mmol/L 无机磷,临用前用蒸馏水稀释 10 倍至 0.5 mmol/L 备用。
血磷主要指血中的无机磷,以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度关系密切,在以 mg/dL 表示时,二者的乘积([Ca]×[P])为 30~40。当([Ca]×[P])>40,则钙和磷以骨盐形式沉积于骨组织;若([Ca]×[P])<35 则妨碍骨的钙化,甚至可使骨盐溶解,影响成骨作用。血钙和血磷含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。上述平衡受到维生素 D3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。
去除血清中有机磷后,无机磷盐与钼酸铵试剂生成磷钼酸,被硫酸亚铁还原后呈蓝色,在 660nm 有光吸收; 通过测定 660nm 吸光度,计算血液中磷含量。
最低检出限:0.0082 mmol/L
线性范围:0.015625-1 mmol/L
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
血清预处理:吸取50μL血清,加950μL试剂一,混匀后室温8000rpm,离心10min,取上清液,待测。
试剂名称(μL) |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
标准液 |
|
250 |
|
上清液 |
|
|
250 |
蒸馏水 |
250 |
|
|
试剂一 |
250 |
250 |
250 |
试剂三 |
500 |
500 |
500 |
混匀后静置10min,于660nm测定吸光度,分别记为A空白管、A标准管、A测定管。
血磷含量(mmol/L)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×样本稀释倍数
=10×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
C 标准液:标准液的浓度,0.5mmol/L;样本稀释倍数:(50 μL 血清+950μL 试剂一)÷50 μL 血清=20。
1、 试剂三需临用前配制,如未用完,4℃保存,最多可使用 3 天;
2、 测定过程中,应尽量避免溶血,因为红细胞中有机磷酯进入血清后可被酶水解而使得血清无机磷含量增高;
3、 结果于 40min 内测定完毕;
4、 如果样本吸光值大于 0.78,建议将样本用试剂一稀释后进行测定。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到