土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒



试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 2 mL×1 瓶(自备)

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2

2-8℃保存

试剂三

液体 20mL×1

2-8℃保存

试剂四 A

液体 1 mL×1

2-8℃保存

试剂四 B

液体 4 mL×1

2-8℃保存

试剂五

液体 0.3 mL×1

2-8℃保存

标准品

液体 1 mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:自备甲苯;

2 试剂二:临用前取 1 瓶加入 2.7 mL 蒸馏水,充分溶解待用,用不完的试剂 2-8℃保存 4 周;

3 试剂四:临用前将 A 液和 B 液按体积比 1:4 混合待用;用多少配多少;

4 试剂五:液体置于试剂瓶内 EP 管中,使用前需先离心。临用前加入 5.7 mL 蒸馏水,混匀,待用;用不完的试剂 2-8℃保存两周;

5 标准品:1 mg/mL 氮标准液。

产品说明:

S-UE 能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增   加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、   冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。


操作步骤:

一、 样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。

 

二、 测定步骤

1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 630nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2、培养

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.05

0.05

试剂一(μL

20

20

振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置 15min

试剂二(μL

90

-

蒸馏水(μL

-

90

试剂三(μL

190

190

混匀,放入 37℃水浴或恒温培养箱培养 24h 后,10000g 常温离心 10min,取上清液。

 

3、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)。若最终计算得到的ΔA仍大于1则继续    稀释。

4、标准品的准备:吸取适量的标准溶液,用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0(空白管)μg/mL,可参考   下表。

序号

稀释前浓度(μg/mL

标准液体积(µL

蒸馏水体积(µL

稀释后浓度(μg/mL

1

1000

15

1475

10

2

10

400

100

8

3

10

300

200

6

4

10

200

300

4

5

4

250

250

2

6

2

250

250

1

7

1

250

土壤尿酸酶活性检测试剂盒

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