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货号:UPLC-MS-4045 规格:100T/48S 微量法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 2 mL×1 瓶(自备) |
2-8℃保存 |
试剂二 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体 20mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂四 A 液 |
液体 1 mL×1 支 |
2-8℃保存 |
试剂四 B 液 |
液体 4 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂五 |
液体 0.3 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:自备甲苯;
2、 试剂二:临用前取 1 瓶加入 2.7 mL 蒸馏水,充分溶解待用,用不完的试剂 2-8℃保存 4 周;
3、 试剂四:临用前将 A 液和 B 液按体积比 1:4 混合待用;用多少配多少;
4、 试剂五:液体置于试剂瓶内 EP 管中,使用前需先离心。临用前加入 5.7 mL 蒸馏水,混匀,待用;用不完的试剂 2-8℃保存两周;
5、 标准品:1 mg/mL 氮标准液。
S-UE 能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、 冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 630nm,分光光度计用蒸馏水调零。
2、培养
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
风干土样(g) |
0.05 |
0.05 |
试剂一(μL) |
20 |
20 |
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置 15min |
||
试剂二(μL) |
90 |
- |
蒸馏水(μL) |
- |
90 |
试剂三(μL) |
190 |
190 |
混匀,放入 37℃水浴或恒温培养箱培养 24h 后,10000g 常温离心 10min,取上清液。 |
3、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)。若最终计算得到的ΔA仍大于1则继续 稀释。
4、标准品的准备:吸取适量的标准溶液,用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0(空白管)μg/mL,可参考 下表。
序号 |
稀释前浓度(μg/mL) |
标准液体积(µL) |
蒸馏水体积(µL) |
稀释后浓度(μg/mL) |
1 |
1000 |
15 |
1475 |
10 |
2 |
10 |
400 |
100 |
8 |
3 |
10 |
300 |
200 |
6 |
4 |
10 |
200 |
300 |
4 |
5 |
4 |
250 |
250 |
2 |
6 |
2 |
250 |
250 |
1 |
7 |
1 |
250 |
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