土壤过氧化物酶检测方法(新型)



     本文章的目的是测说明非诱变化合物 3,3',5,5'-四甲基联苯胺 (TMB) 作为森林表土中过氧化物酶的底物,作为常规底物 l-3,4 的替代品-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)。TMB 高度敏感;对于 1000 倍稀释的土壤,在 20 分钟内实现了 0.6 的线性吸光度变化。土壤悬浮液的短暂加热(变性)使 TMB 氧化减少了 34 倍,表明 TMB 测量的反应确实是酶促反应。TMB 氧化在 pH 4.4 处显示窄峰。当土壤悬浮液被稀释时,过氧化物酶活性的成比例下降表明,当校正样本量的差异时,TMB 对过氧化物酶活性的估计值具有直接可比性。在没有 H2O2 的情况下,TMB 的氧化很慢,这表明 TMB 是苯酚氧化酶的不良底物。TMB 氧化在九种不同的森林表土中进行了测试。当归一化为土壤有机质的量时,过氧化物酶活性的范围为 1.4±0.1Δabs450h-1mg-1 至 34.9±4.3Δabs450h-1mg-1。


相比之下,土壤过氧化物酶商业过氧化物酶对 l-DOPA 的氧化给出了不一致的结果,这表明在使用 l-DOPA 作为土壤过氧化物酶底物时应谨慎。与 l-DOPA 相比,TMB 的高灵敏度以及来自酚氧化酶和腐殖质物质的低干扰表明,TMB 是比 l-DOPA 更好的底物,用于估计森林表土的过氧化物酶活性。当归一化为土壤有机质的量时,范围从 1.4±0.1Δabs450h-1mg-1 到 34.9±4.3Δabs450h-1mg-1。相比之下,土壤过氧化物酶和商业过氧化物酶对 l-DOPA 的氧化给出了不一致的结果,这表明在使用 l-DOPA 作为土壤过氧化物酶底物时应谨慎。

      与 l-DOPA 相比,TMB 的高灵敏度以及来自酚氧化酶和腐殖质物质的低干扰表明,TMB 是比 l-DOPA 更好的底物,用于估计森林表土的过氧化物酶活性。当归一化为土壤有机质的量时,范围从 1.4±0.1Δabs450h-1mg-1 到 34.9±4.3Δabs450h-1mg-1。相比之下,土壤过氧化物酶和商业过氧化物酶对 l-DOPA 的氧化给出了不一致的结果,这表明在使用 l-DOPA 作为土壤过氧化物酶底物时应谨慎。与 l-DOPA 相比,TMB 的高灵敏度以及来自酚氧化酶和腐殖质物质的低干扰表明,TMB 是比 l-DOPA 更好的底物,用于估计森林表土的过氧化物酶活性。



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