小液流法测定植物组织水势



1.原理

    当植物组织和外界蔗糖溶液接触时,若组织水势小于外液渗透势,水分进入植物组织,外液浓度增高;相反,组织水分进入外液,使外液浓度降低;若二者水势相等,组织不吸水也不失水,外液浓度不变。溶液浓度不同,密度不同。取浸过植物组织的蔗糖溶液一小滴(为便于观察加入少许甲烯蓝),放入未浸植物组织的原浓度溶液中,观察有色溶液的浮尘:液滴上浮,表示浸过样品后溶液浓度变小;液滴下沉,表示溶液浓度变大;若液滴不动,表示浓度未变,该溶液水势即等于植物组织水势。实际测定时,常常不易找到有色液滴不动的溶液,而是取接近植物组织水势的相邻两种溶液浓度的平均值。

小液流法

2.仪器设备

(1)、水势测定取样箱(大小根据需要确定。其中放湿润滤纸,保持高相对湿度)。
(2)、小试管:12mm×100mm,36-48个,洗净烘干。
(3)、大试管:15mm×150mm,18-24个,洗净烘干。
(4)、毛细移液管:36-48个,洗净烘干。
(5)、剪刀、刀片、打孔器、镊子。
(6)、干净硬纸片:20cm×20cm2,2张。
(7)、试管架:2个。

3.试剂

1、蔗糖溶液:按重量法试剂配制要求配制蔗糖溶液,或按下表配成不同水势蔗糖溶液。

蔗糖溶液水势/MPa 100mL蒸馏水加入蔗糖/g 蔗糖溶液水势/MPa 100mL蒸馏水加入蔗糖/g
0.2 2.74 1.6 20.99
0.4 5.45 1.8 23.42
0.6 8.11 2.0 25.86
0.8 10.74 2.2 28.28
1.0 13.34 2.4 30.68
1.2 15.91 2.6 33.04
1.4 18.44 2.8 35.38

2、甲烯蓝(研成粉末或配成不同水势的甲烯蓝蔗糖溶液)。

4.方法步骤

(1)、取5-6个干净的小试管(或青霉素小瓶)和相同数量的大试管,贴不同水势(或浓度)标签。向大试管中加入不同水势蔗糖溶液10mL。
(2)、剪取欲测叶片,用刀片切成0.5×0.5cm2小片,混匀,分别装入小试管(或青霉素小瓶)底部,每瓶装8片左右。向各瓶分别加入不同水势蔗糖溶液4-5滴,加盖,摇匀,放少许甲烯蓝(或一小滴相同浓度的甲烯蓝溶液)。
(3)、用干净的毛细移液管,吸挤小试管底部蓝色溶液,使其充分混合均匀,并吸取1-2滴,小心地插入装着相对应同浓度蔗糖溶液大试管中部,轻轻地挤出一小滴蓝色溶液,慢慢转动毛细管头部,抽出毛细移液管,观察蓝色液滴流动方向。

5.结果计算

蓝色溶液不动的试管或蓝色液滴上浮、下沉的两个相邻试管蔗糖浓度的平均值,即为等势点。假如蔗糖溶液按水势值配制,测出结果不必再进行运算。若蔗糖溶液按摩尔浓度配制,按下式计算植物组织水势。

Ψw=-iRTC

式中,Ψw:由蔗糖溶液换算为植物组织水势,单位为标准大气压,最后变为bar(1.013 bar=1 atm,1 atm=101 kPa),再换算为MPa(1 MPa=10 bar);C:溶液的摩尔浓度(mol/L);R:摩尔气体常数,0.008314 MPa·L·mol-1·K-1;T:热力学温度(K),即273+t(t为当时摄氏温度);i:解离常数(蔗糖=1)。

6.注意事项

(1)、小液流法中用的毛细移液管尖端需弯成直角,以保证从滴管出来的液滴不受向下力的影响。
(2)、毛细移液管延试管壁慢慢抽出,以防溶液振动,影响蓝色液滴的运动。


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