钼是已知植物必需的营养元素中需要量最少的一个，但在我国农业生产上是应用最早的一种微量元素。在各种植物中以豆科和十字花科植物对钼肥的反应最好。测定植物中的钼含量可以了解土壤的供钼状况和植物对钼的吸收、积累和分布情况，而且还能在植物尚无缺素或毒害症状出现之前及早发现问题，及早采取措施进行防治。本文介绍了植物钼的测定测定方法及实验步骤。

植物的含钼(Mo)量变异极大，从0.1 mg • kg-1~300 mg • kg-1(干重)。一般植物的含钼(Mo)量为0.1 mg • kg~2.0 mg • kg-1,低于0.1 mg • kg-1缺钼，豆类植物低于0.4 mg • kg-1缺钼。植物的不同部位含钼量不同，叶片含钼量比茎多几倍，豆科植物种子中的含铝量比茎叶高。种子中的含钼量有时也可用作预测植物对施钼肥的反应，例如豌豆种子钼(Mo)0.17 mg • kg~时,对钼肥有反应:0.66 mg • kg-1时，施钼肥无反应。玉米种子含钼(Mo)0. 08 mg • kg-1时，出苗正常:;0.03 mg • kg 1~0.06 mg • kg-1时，略显缺钼症状;小于0.02 mg • kg-1时，则呈现严重缺钼症状。植物含钼的致毒量差异很大，有的超过100mg • kg-1也无中毒症状，但在牧草中钼含量超过15 mg • kg-1时,能使牛发生钼毒病。

方法选择的依据

在比色法中最常用的是KCNS法，自1863年创始一直沿用至今，该法灵敏度较高，测定范围在0.1 mg • L-1~2 mg • L-1,极限可测0.04 mg • L-1~3 mg • L-1钼,但对显色条件要求严格。二硫酚法也可用于钼的比色测定,但铜和铁均有干扰,必须先经分离后再用二硫酚显色，操作较繁,所以目前仍以采用KCNS法较多。

近年来,我国学者利用极谱催化波测钼的方法进行了很多研究,证明钼-苯羟乙酸-氯酸盐体系催化波极谱法是所有测钼方法中最灵敏的方法，钼的检测下限达到0.06pg • L-1左右,干扰元素少,方法简便,稳定性好,准确度高，已被广泛采用。原子吸收分光光度法(AAS)测定钼，由于钼的离解能较高，须用氧化亚氮和乙炔高温火焰,故少采用。等离子体原子发射光谱(ICP-AES)是70年代崛起的分析仪器，它比AAS具有更多优点,精密度高，检出限低、动态范围宽，基体效应小等，而其最突出的优点，乃是能同时进行多元素的测定(详见第十七章中的土壤全钼的测定)。故可根据分析要求及实验室仪器设备条件选择极谱(催化波)法或ICP-AES法,无此仪器设备时可选用KCNS法。

硫氰酸钾比色法

方法原理

植物样品经干灰化法分解,用HCI溶解灰分。在酸性溶液中,六价钼被还原剂氯化亚锡还原成五价钼，与硫氰根离子形成橙黄色的络合物。再用有机溶剂萃取浓缩进行比色测定钼。其原理详见第十七章中的土壤有效钼测定。

仪器及设备

高温电炉;石英或瓷蒸发皿(100mL)。

试剂

盐酸溶液[c(HCl)=6 mol • L-1]:浓盐酸(HCl,ρ≈1.19g • cm-3,优级纯)与水等体积混合;

操作步骤

1.干灰化 称取烘干磨碎(0.5mm)植物样品5.000g~10.000g(视植物含钼(Mo)量高低而定),置于石英或瓷蒸发皿中,在电炉上缓缓加热炭化，至不冒烟时,移人高温电炉中，逐渐升温至500℃,灰化3h。冷却后，滴加少量水润湿灰分，加盖表面皿,小心地分次加入30 mL盐酸溶液(试剂1)溶解灰分，加20 mL水,加热煮沸5 min促使其溶解。用定量滤纸过滤人100 mL容量瓶中,用热水洗涤蒸发皿和滤纸上残渣，冷却后用水定容(如灰化不完全，可将残渣和滤纸烘干，重新灰化。经HCI溶解后一并测定),或者不定容，全部试液均用于测定。

2. KCNS显色吸取50.0 mL试液(含Mo1 μg~3 μg，HCl约1.2 mol • L-1)于125mL分液漏斗中,加10 mL氯化铁溶液[ρ(FeCl3)=0.5g • L-1],摇匀。

3.工作曲线绘制。

结果计算

ω(Mo)=ρ×V×ts/m

式中:ω(Mo)——植物中全钼(Mo)的质量分数，mg • kg-1;
ρ——测得显色液中钼(Mo)的质量浓度,mg • L-1;
ts——分取倍数100/50;
V——比色时定容体积,mL;
m——烘干样品质量,g。

极谱(催化波)法

方法原理

用极谱催化波法测定钼,其灵敏度远高于KCNS比色法。只需称取1g左右样品，经干灰化后,用HCI溶解灰分,蒸干后,加支持电解质苯羟乙酸-氯酸盐硫酸溶液,直接用催化极谱法测定钼。

仪器及设备

高温电炉;石英坩埚或瓷坩埚(30mL)。

试剂

1.盐酸溶液(1 : 5,优级纯)。

2.硫酸溶液[c(H2SO4)=2.5 mol • L-1]:量取140 mL浓硫酸(H2SO4,ρ≈1.84 g • mL-1,优级纯)，缓缓注人水中，定容至1 L;

3.苯羟乙酸溶液[c(C8H8O3)=0.5 mol • L-1]:苯羟乙酸(苦杏仁酸C8H8O3,分析纯)，用二次蒸馏水配制(宜新配,可连续使用一周);

4.饱和氯酸钠溶液(NaCl3,分析纯);

5.钼(Mo)标准溶液:0.1500 g三氧化钼(MoO3,光谱纯)溶于10 mL氢氧化钠溶液[c(NaOH)=1 mol • L-1门溶液中，加HCI酸化,用去离子水定容至1L，此为ρ(Mo)= 100 mg • L-1贮存溶液。再稀释成含Mo 0. 004 mg • L-1、0.008 mg • L-1、0.012 mg • L-1、0.016mg • L-1、0.020mg • L-1的标准系列溶液。

操作步骤

1.干灰化 称取烘干磨碎(O.5 mm)植物样品1.000g于石英或瓷坩埚中,在电炉上缓缓加热炭化，待烟冒尽,移人高温电炉中,于525℃温度下灼烧2h{若有黑色炭粒，可将坩埚取出冷却，滴加硝酸铵溶液[ρ(NH4NO3)=300g • L-1],湿润后,先于低温蒸干，再灼烧1h}。冷却后,用水润湿,加人10 mL HCI(1 : 5)溶液溶解灰分,过滤于100 mL容量瓶中,洗涤残渣及坩埚,最后用水定容。

2.极谱测定吸取1. 00 mL定容试液于25 mL烧杯中,在电砂浴上小心蒸干。冷却后，加人1 mL硫酸溶液(试剂2),1 mL苯羟乙酸(试剂3),10 mL饱和氯酸钠溶液(试剂4),摇匀，静置0.5h后于示波极谱仪上测定。记录电流倍率和峰电流值(格数)。样品测定同时进行空白试验。

3.工作曲线绘制 分别吸取含 Mo 0.004 mg • L-1、0. 008 mg • L-1、0. 012 mg • L-1、0.016mg • L-1、0.020mg • L-1标准系列溶液各1.00mL于25mI烧杯中,各加1.00mL空白液,蒸干后以下操作同2.。以测得的峰电流值与对应的钼浓度作标准曲线或计算回归直线方程。